Die TSKgel FcR-IIIA Säulen von Tosoh Bioscience trennen monoklonale Antikörper (mAb) anhand der Affinität ihrer Fc-Region zu einem bestimmten Fc-Rezeptor (FcγIIIa) auf. Eine rekombinante Version des FcγIIIa-Rezeptors ist an die stationäre Phase der HPLC- Säulen gekoppelt und sorgt für die Autfrennung. Die FcγIIIa-Rezeptor-Affinität eines mAbs hängt direkt mit dessen Glykosylierung und der Antikörper-abhängigen zellulären Zytotoxizität (ADCC) zusammen. Somit gibt die schnelle FcR-IIIA Auftrennung Aufschluss über Funktion und Struktur des mAbs. Zudem können verschiedene FcγIIIa-Rezeptor-Affinitätsfraktionen mit orthogonalen Methoden charakterisiert werden, um strukturelle Ursachen und funktionellen Effekte der FcγIIIa-Rezeptor-Affinität zu untersuchen.
Innovation:
Bisherige chromatographische Analysen von therapeutischen Antikörpern konzentrieren sich auf den Nachweis von strukturellen Unterschieden, die mit funktionellen und sicherheitsrelevanten Beeinträchtigungen einhergehen. Im Gegensatz dazu analysiert die FcR-IIIA-Affinitätschromatographie eine Eigenschaft, die direkt mit der Antikörperfunktion zusammenhängt: Affinität zum FcγIIIa-Rezeptor. Die Trennungsergebnisse korrelieren mit Glykosylierungsmustern und der Aktivität der Antikörper-abhängigen zellulären Zytotoxizität (ADCC), so dass diese neue einzigartige Methodik aktuelle analytische Ansätze ergänzen und teilweise ersetzen kann.