Bestimmung von Histon-Deacetylasen

Mit dem HDAC-Glo 2 Activity Assay erweitert Promega sein Portfolio zur Bestimmung der Aktivität von Histon-Deacetylasen. Der Assay ermöglicht es, die Aktivität der Histon-Deacetylase 2 (HDAC2) in Zellen, Extrakten oder aus aufgereinigten Enzymen spezifisch und hochsensitiv zu bestimmen.
Der lumineszente Assay ist mindestens 100 mal sensitiver als vergleichbare Messungen mit fluoreszenten Verfahren und kann mit zellbasierten Methoden zur gleichzeitigen Bestimmung von Zellviabilität und Zytotoxizität kombiniert werden.

Der Assay basiert auf der enzymatischen Kopplung der Histon-Deacetylase (HDAC2) Enzymaktivität an eine Luciferase Reaktion. Nach Zugabe des Assayreagenz wird das Substrat im ersten Schritt deacetyliert und das resultierende Peptid für die proteolytische Spaltung zugänglich. In Folge dient das freigesetzte Aminoluciferin als Substrat für die nachgeschaltete Luciferasereaktion.